犬狂犬病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

犬狂犬病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）说明书

【产品名称】
　　通用名称：犬狂犬病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）　　

英文名称：Test Kit for Antibody to Rabies Virus (ELISA for Canine)

【包装规格】48份/盒、96份/盒

【预期用途】本试剂盒采用酶联免疫方法（ELISA）检测犬血清中的特异性抗狂犬病毒抗体，用于犬只免疫后抗体监测。

【主要组成成份】

【储存条件及有效期】

1. 2~8℃避光保存，防止冷冻，有效期为12个月。

2. 包被板开封后2~8℃避光保存，使用期限为15天。

【适用仪器】

含450nm和630nm波长酶标仪；37℃恒温设备；可调微量移液器。

【样本要求】

1. 为取得最佳实验效果，避免使用含叠氮钠、高血脂、长菌以及严重溶血的样品；

2. 短期（7天）将进行检测的血清样品可存放于2～8℃；如需长期保存，应置于-20℃或以下，避免反复冻融。

【检验方法】

1. 酶结合物工作液配制：取1支酶结合物原液全部加入到1支酶结合物稀释液中，充分混匀即可使用。

2. 洗涤液配制：每袋PBST干粉用蒸馏水500ml溶解混匀，即为洗涤液。

3. 加样反应：每孔滴加样品稀释液2滴，加待检样品各5ul。每次试验需设阴性对照、临界对照各2孔，空白孔1孔 （阴性对照、临界对照已稀释，试验时可直接取100ul加入孔内，空白孔仅加2滴样品稀释液）。放置37℃20分钟。甩去孔内液体，每孔注满工作浓度洗涤液洗涤5次，每次均需停留30秒钟；最后一次甩净，拍干。

4. 加酶反应：除空白对照孔外，其余每孔加已稀释的酶结合物2滴，置37℃ 20分钟。甩去孔内液体，如上洗涤，拍干。

5. 显色反应：加底物（3号液）和显色剂（4号液）各1滴，混匀，37℃下避光显色10分钟。

6. 终止反应： 加终止液（6号液）1滴，以空白对照调零，用酶标仪于450nm波长（630nm作为参比波长）读取OD值。

【参考值】

有效性判定：

空白对照孔OD值＜0.05（若大于0.05则实验无效）；

阴性对照孔OD值≤0.15（若大于0.15则实验无效）；

临界对照孔OD值≥0.20（若小于0.20则实验无效）。

【检验结果的解释】

样本OD值≥临界对照OD值时，判为狂犬病毒抗体浓度≥0.5 IU/ ml；

样本OD值＜临界对照OD值时，判为狂犬病毒抗体浓度＜0.5 IU/ml。                        

【检验方法的局限性】本试剂仅适用检测犬血清。

【注意事项】

1. 包被板须密封防潮。从冷藏环境中取出时，应平衡至室温后，方可开封启用。未使用完的板条应即时放回有干燥剂的自封袋中，4℃密封保存。

2. 滴加试剂前应将滴瓶轻摇、混匀，首滴弃去；滴加试剂时瓶身应保持竖直。

3. 瓶盖每次使用后要盖紧，各瓶盖之间不可混用。不同批号试剂盒的试剂组份不可混用。

4. 孵育时，推荐使用水浴箱。如无水浴箱，可取密封湿盒放入37℃温箱内使用。

5. 用弃的试剂盒及样本都应按污染物妥善处理。试剂盒内终止液有腐蚀性，须小心使用。