犬粪包虫抗原检测试剂盒（酶联免疫法）

犬粪包虫抗原检测试剂盒（酶联免疫法）说明书

【产品名称】
　　通用名称：犬粪包虫抗原检测试剂盒（酶联免疫法）　　

英文名称：Test Kit for Canine Hydatid Coproantigen (ELISA)
【包装规格】48份/盒、96份/盒
【预期用途】本试剂盒采用夹心法ELISA定性检测犬粪中特异性包虫抗原。                                                                             

【主要组成成份】

【储存条件及有效期】

1. 2~8℃避光保存，防止冷冻，有效期为12个月。

2. 包被板开封后2~8℃避光保存，使用期限为15天。

【适用仪器】

含450nm和630nm波长酶标仪；37℃恒温设备；可调微量移液器。

【样本要求】

应采集新鲜的犬粪样本进行测试。若不能及时检测，应将粪样放置低温冻存，防止腐败或反复冻融。如犬粪难以溶解，应适当捣碎处理。

【检验方法】

1. 样品处理： 犬粪样品需要预先低温（-70℃以下）冷冻7天以上，以灭活虫卵。称取 1 克犬粪,加入1ml已用等体积去离子水稀释的样本稀释液，充分搅拌混匀，静置10分钟，再经3000rpm离心10分钟，取上清液检验。

2. 加样反应： 每次实验设阳性对照、空白对照各1孔，阴性对照2孔（其中分别加入阳性对照、样本稀释液及阴性对照各100μl），样品检测孔分别取犬粪上清液100μl加入。37℃下避光反应30分钟。甩去孔内液体。用已稀释的洗涤液洗涤4次，每次静置1分钟，拍干。

3. 加酶反应：除空白对照孔外，其余每孔加酶结合物（1号液）2滴，37℃避光反应30分钟。甩去孔内液体，用已稀释的洗涤液洗涤3次，每次静置1分钟，拍干。

4. 显色反应：加底物（3号液）和显色剂（4号液）各1滴，混匀，37℃下避光显色10分钟。

5. 终止反应： 加终止液（6号液）1滴，以空白对照调零，用酶标仪于450nm波长（630nm作为参比波长）读取OD值。

【参考值】

1. Cut-off 值 (COV)=阴性对照平均OD值×3.1 (阴性对照孔OD值＜0.10时按0.10计)。

2. 有效性判定：

空白对照孔OD值＜0.05（若大于0.05则实验无效）；

阴性对照孔OD值≤0.15（若大于0.15则实验无效）；

阳性对照孔OD值≥0.50（若小于0.50则实验无效）。

【检验结果的解释】

样本OD值≥COV值时，判为犬粪包虫抗原阳性；

样本OD值＜COV值时，判为犬粪包虫抗原阴性。                         

【检验方法的局限性】本试剂适用于检测犬粪标本

【注意事项】

1. 包被板须密封防潮。从冷藏环境中取出时，应平衡至室温后，方可开封启用。未使用完的板条应即时放回有干燥剂的自封袋中，4℃密封保存。

2. 滴加试剂前应将滴瓶轻摇、混匀，首滴弃去；滴加试剂时瓶身应保持竖直。

3. 瓶盖每次使用后要盖紧，各瓶盖之间不可混用。不同批号试剂盒的试剂组份不可混用。

4. 孵育时，推荐使用水浴箱。如无水浴箱，可取密封湿盒放入37℃温箱内使用。

5. 用弃的试剂盒及样本都应按污染物妥善处理。试剂盒内终止液有腐蚀性，须小心使用。