猪囊虫抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

猪囊虫抗体检测试剂盒（酶联免疫法）说明书

【产品名称】
　　通用名称：猪囊虫抗体检测试剂盒（酶联免疫法）　　

英文名称：Test Kit for Antibody to Cysticercus racemosus (ELISA for Swine)
【包装规格】48份/盒、96份/盒
【预期用途】本试剂盒采用间接法ELISA定性检测猪特异性囊虫抗体。                                                                             

【主要组成成份】

【储存条件及有效期】

1. 2~8℃避光保存，防止冷冻，有效期为12个月。

2. 包被板开封后2~8℃避光保存，使用期限为15天。

【适用仪器】

含450nm和630nm波长酶标仪；37℃恒温设备；可调微量移液器。

【样本要求】

1. 为取得最佳实验效果，避免使用含叠氮钠、高血脂、长菌以及严重溶血的样品；

2. 短期（7天）将进行检测的血清样品可存放于2～8℃；如需长期保存，应置于-20℃或以下，避免反复冻融。

【检验方法】

1. 加样反应：取出所需量的反应板条，每孔加样本稀释液（5号液）2滴，再分别加入待检的血清样本10μl，混匀。同时设阴性、阳性及空白对照各1孔，阴性、阳性对照与待检样本同步处理，空白对照孔仅加入样本稀释液（5号液）2滴。37℃避光反应30分钟。甩去孔内液体，每孔加洗涤液（2号液）1滴，立即用蒸馏水注满，静置30秒后甩去；再直接用蒸馏水洗涤四次，每次均需静置30秒；最后一次甩去拍干。

2. 加酶反应：除空白对照孔外，其余每孔加酶结合物（1号液）2滴，37℃避光反应30分钟。甩去孔内液体，如上洗涤，拍干。

3. 显色反应：加底物（3号液）和显色剂（4号液）各1滴，混匀，37℃下避光显色10分钟。

4. 终止反应：加终止液（6号液）1滴，以空白对照调零，用酶标仪于450nm波长（630nm作为参比波长）读取OD值。

【参考值】

1. Cut-off 值 （COV）=阴性对照OD值×2.1 （阴性对照孔OD值＜0.05时，按0.05计）。

2. 有效性判定：

空白对照孔OD值＜0.05（若大于0.05，则实验无效）；

阴性对照孔OD值≤0.10（若大于0.10，则实验无效）；

阳性对照孔OD值≥0.3（若小于0.3，则实验无效）。

【检验结果的解释】

样本OD值≥COV值时，判为囊虫抗体阳性；

样本OD值＜COV值时，判为囊虫抗体阴性。                         

【检验方法的局限性】本试剂适用于检测猪血清。

【注意事项】

1. 包被板须密封防潮。从冷藏环境中取出时，应平衡至室温后，方可开封启用。未使用完的板条应即时放回有干燥剂的自封袋中，4℃密封保存。

2. 滴加试剂前应将滴瓶轻摇、混匀，首滴弃去；滴加试剂时瓶身应保持竖直。

3. 瓶盖每次使用后要盖紧，各瓶盖之间不可混用。不同批号试剂盒的试剂组份不可混用。

4. 孵育时，推荐使用水浴箱。如无水浴箱，可取密封湿盒放入37℃温箱内使用。

5. 用弃的试剂盒及样本都应按污染物妥善处理。试剂盒内终止液有腐蚀性，须小心使用。